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产品简介:

         Taq Plus DNA Ploymerase是Taq酶和Pfu酶的混合物,既有5’→ 3’核酸外切酶活性,又有3’→5’核酸外切酶活性。Taq Plus DNA Ploymerase兼具Taq DNA Ploymerase的高效率及Pfu DNA Ploymerase的高保真性的特点。与Taq酶相比,Taq Plus DNA Ploymerase具有扩增长度增加(对模板有效扩增长度可达10kb)、保真度好等优点;与Pfu酶相比,具有扩增速度快、反应效率高的优势。常用于一些对保真度要求高和模板结构复杂(如GC含量高、有二级结构等)的PCR扩增。其PCR产物可直接进行TA克隆,如需提高克隆效率,建议先纯化,加A后再进行TA克隆。   

活性定义:

         1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制:

         SDS-PAGE检测Taq plus DNA Polymerase纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。

酶贮存缓冲液:

         20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol;其他成份。

适用范围:

         用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析(SNP)和末端补平等。

注意事项:

1、PCR反应体系加样时,最后一步加入Taq Plus DNA Ploymerase,整个过程宜在冰上操作。

2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。

3、10×Taq Plus Buffer中含15 mM Mg2+,如PCR反应需要较高Mg2+浓度,请另行加入。

4、一般情况下,Taq Plus DNA Ploymerase 可以很好地扩增10kb以下的片段。能否成功扩增更长的片段,主要与模板的结构和引物的设计有关,如果扩增长片段有困难,最好选用Long Taq DNA Ploymerase。

Storage:
-20℃保存, 有效期至少一年。
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