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Bradford蛋白浓度测定试剂盒

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Bradford蛋白浓度测定试剂盒 2500微孔(250T) 247.5元 现货
性状:
组成 包装(2500微孔) 保存
    5×G250染色液 100ml 2-8℃
    PBS稀释液 30ml 2-8℃
    蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml -20℃

本试剂盒自订购之日起九个月内有效。

质量标准:
产品简介:
    考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595,与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒。

操作说明:
一.微孔酶标仪法
    1. 完全溶解蛋白标准品,取10ml,稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
    2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml  5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成 1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
    3. 将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
    4. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
    5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
    6. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
    7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

二.分光光度计法
如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。

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