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Taq DNA 聚合酶

英文名称:
Taq DNA Polymerase
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Taq DNA 聚合酶 500u 330元 现货
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产品简介:本制品是94KD的耐热的DNA聚合酶。是把Thermusaquaticus DNA Polymerase的基因¾­过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的。它与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。该酶反应需Mg2+参与,它以双链DNA为模板催化核苷酸从5’向3’末端形成双链DNA。该酶同时具有5’→3’核酸外切酶活性。该产品主要用于DNA的PCR扩增,DNA测序,可以很好地扩增1kb的DNA片段。该产品主要包括酶、10×反应缓冲液与氯化镁溶液。

单位定义:在74℃,30分钟内,能够吸收10mmol dNTP,形成酸性不溶性物质所需的酶量为一个活性单位。

酶储存缓冲液B:50%甘油,20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5%Tween20和0.5%Nonidet P40。

配套试剂:

1.10×反应缓冲液(不含MgCl2): Taq DNA Polymerase 10 X Reaction buffer (without Mg2+)包含 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫摩尔。

2.25mM MgCl2:反应中镁离子在混合物中的最终浓度由使用者根据自己需要决定。建议使用浓度在1£­4毫摩尔。注:使用前完全溶解氯化镁溶液并充分振荡几秒钟。

3.10X反应缓冲液(含MgCl2):包含 15mM MgCl2,500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫摩尔。

注意:反复冻融可能会引起氯化镁沉淀,将缓冲液在90℃加热10分钟能恢复溶液的均一性。

质量控制:

1. 活性:大于5单位/微升。

2. Overdigest (OD) 检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克λDNA在74℃下反应16小时后,用琼脂糖凝胶电泳未检出降解的λDNA。

3. 切口酶检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克超螺旋质粒DNA在74℃下反应4小时后,用琼脂糖凝胶电泳未检出切口酶或线性DNA带。

4. 热稳定性检测: 94℃时,每微升5单位Taq DNA 聚合酶在缓冲液中的半衰期长于1小时。

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